Fehérjék osztályozása IgY termékekkel
Könnyítse meg a vérszérum és plazma fehérjéinek vizsgálatát a Beckman Coulter IgY termékével.
A Proteomlab IgY kitjei azt a célt szolgálják, hogy a biológiai folyadék mintákból, mint például szérumból, plazmából eltávolítsák a további vizsgálatokat zavaró, nagy mennyiségben jelenlévő fehérjéket. Így a kisebb koncentrációban a mintában lévő fehérjék könnyebben vizsgálhatóak és például biomarkerek, valamint gyógyszer célmolekulák további vizsgálata is könnyebbé válik.
A módszer csirke poliklonális IgY antitestekkel működik, melyek olyan előnyös tulajdonságokkal bírnak, hogy nem kötődik Fc régiójuk olyan faktorokhoz, melyekhez az emlős eredetű antitestek pl. rheumatoid factor, IgM Fc receptor, Protein A vagy G. Az IgY antitest többszörös epitóp szekvenciákon keresztül nagyon specifikusan kötődik a kívánt fehérjékhez kihasználva az emlősök és madarak közötti filogenetikai különbséget.
Az IgY kitek spin és LC oszlopos formátumban kaphatóak, melyekben az anti IgY antitestek Fc régiójukon keresztül az oszlop töltetét adó 60 μm mikrogyöngyökhöz kötődnek. A kitek az oszlopok mellett kötő, valamint mosó és eluáló puffereket is tartalmaznak, melyek 100 tisztításhoz biztosítanak elegendő reagenst. A kitek két formátumban hozzáférhetőek: van a szérum 12 legnagyobb mennyiségű fehérjéjét eltávolító és van a 7 legnagyobb mennyiségű fehérjéjét eltávolító változatuk. Így az IgY -12 kitek a szérumból az albumint, IgG-t, transzferrint, fibrinogént, IgA-t, α2-makroglobulint, IgM-et, α1-antitripszint, haptoglobint, orozomukoidokat, apolipoprotein A-I-et és az apolipoprotein A-II-t távolítják el, míg az IgY-7 kitek az albumint, IgG-t, α1-antitripszint, IgM-et, transzferrint, haptoglobulint és fibrinogént kötik meg.
A megfelelő kit kiválasztása nemcsak az eltávolítandó fehérjék mennyiségétől, hanem a minta kapacitásától is függ, mely 20-250 μl között változhat az IgY-12 esetén.
IgY SC Spin Column kit centrifugálást igényel és 20 μl szérum vagy plazma fehérje/oszlop a kapacitása, mely esetben 160 μg/oszlop a 12 fehérjétől elválasztott minta fehérje tartalma
Az IgY LC2 column kit folyadékkromatográfiás műszert igényel és 50 μl a mintakapacitása. Így a 12 fehérjétől elválasztott minta fehérje tartalma 400 μg/oszlop.
Az IgY LC10 column kit szintén folyadékkromatográfiás műszert igényel és 250 μl a mintakapacitása. Így a 12 fehérjétől elválasztott minta fehérje tartalma 2 mg/oszlop. Az itt kapott fehérje mennyiség már elegendő a minta ProteomLab PF 2D-vel történő frakcionálására, mely a fehérjéket izoelektromos pontjuk és hidrofóbicitásuk alapján választja szét, valamint kétdimenziós elektroforézissel és LC-MS-sel is vizsgálható a minta a továbbiakban. 
Referenciák:
Liu T, Qian WJ, Mottaz HM, Gritsenko MA, Norbeck AD, Moore RJ, Purvine SO, Camp DG 2nd, Smith RD.Evaluation of multi-protein immunoaffinity subtraction for plasma proteomics and candidate biomarker discovery using mass spectrometry. Mol Cell Proteomics. 2006 Jul 19; PMID: 16854842