Bio-Science honlap 0

Get Adobe Flash player

Maxwell 16 (Promega) DNS, RNS és fehérje szeparáló automata (16 minta)

DNS izolálás gombnyomásra - MaxwellTM 16  a Promegától

  

A genomiális DNS izolálás a mai molekuláris biológiai labor rutin eljárásai közé tartozik.     
Jelenleg számos különböző módszer használatos a nukleinsav tisztítására, igazodva a minta típusához és kiindulási  mennyiségéhez, és nem utolsósorban a mintaszámhoz. Az 50-400 minta/hét feldolgozásának automatizálására kevés olyan alternatíva létezik, mely egyesítené az egyszerű kezelhetőséget a konzisztensen nagymennyiségű és tiszta DNS-t produkáló kitekkel, anélkül hogy a rendszer telepítése komolyabb pénzügyi beruházást és külön képzést igényelne. A Promega ezt az űrt igyekszik kitölteni MaxwellTM 16 nevű rendszerével, amely az azonos nevű készüléket és kiteket foglalja magába. A készülék kis méretű (sz/mé/ma : 37,4 x 29,5 x 31,4 cm), alig foglal helyet a munkaasztalon és akár egy átlagos méretű lamináris bokszban is gond nélkül használható. Működtetéséhez nem igényel számítógépet, sőt semmiféle előképzettséggel nem kell rendelkezzünk, mivel a készülék már kész programokat tartalmaz, melyek az egyszerű menürendszer révén pár gombnyomással elérhetők.

A MaxwellTM 16 mágneses elven működő szeparáló készülék, melyben a genomiális DNS megkötése a már más termékekből ismert Magnesil® paramágneses partikulumok (PMP) segítségével történik, azok szilikával bevont felszínén. A PMP-k - felszínükön  a DNS-el - mágnes jelenlétében  könnyen elkülöníthetők az elegyből, mágnes hiányában szabaddá válnak, és mint  nagy felületű szilárd fázis, lehetővé teszik a szennyeződések hatékony eltávolítását. A készülékben egy mozgó fémállványzatot találunk 16 mágnesrúddal. A mágnesrudak alatti platformon 16 műanyag reagens kazettának (és elúciós csőnek) van hely, azaz egyszerre maximum 16 minta feldolgozására van lehetőség. A kitek részét képező egy-egy kazetta 7 welljében  már kiadagolva találjuk az izolálás különböző lépéseihez szükséges anyagokat, ami megkímél a reagensek időrabló bepipettázásától. A mintát csak be kell helyeznünk, vagy pipettáznunk a kazetta lízis puffert rejtő welljébe. A rendszer újdonsága a mágnesrudak végére helyezhető, egyszer használatos műanyag örlőrúd (plunger), mely függőleges irányú mozgásával homogenizálja-feltárja a mintát. Az izolálás elősegítésén túl a PMP-k is az őrlőrudak felszínéhez kötődnek. A különleges kialakítás előnye az, hogy a legtöbb mintafajtából  külön előkezelés (proteináz K, vagy más emésztés, manuális őrlés, frakcionálás, centrifugálás) nélkül izolálható a DNS, amellyel szintén értékes órákat nyerünk (RNS esetén rövid manuális előkészítés szükséges). Az izolálás során az utolsó lépésben egy különálló elúciós csőben történik a PMP-ról a DNS leoldása, melynek hatékonyságát melegítés segíti elő. A rendszer azon laborok igényeit szolgálja a leginkább, ahol a heti mintaszám 50-400 közé esik.  A kiindulási anyagmennyiség mintától függően 10-400 μl, illetve 40-50 mg, az izolálás pedig 30-40 percet vesz igénybe. A MaxwellTM 16 Blood DNA Purification Kit különböző hőmérsékleten tárolt (-20˚, 4˚C, vagy szobahő), vagy friss, humán és állati vérre optimalizált. Mintánként akár 400 μl teljes vér feldolgozható 8-16 μg DNS kihozatallal, a fehérvérsejtszámtól függően. A kit alkalmas alvadásgátolt -  citrát-, EDTA-, vagy heparin -  teljes vérből történő DNS izolálásra. A MaxwellTM 16 Tissue DNA Purification Kit teljes szövet minták (akár 50 mg-ig) esetén biztosítja az előzetes mintakezelés - proteináz K, őrlés - nélküli gyors DNS kinyerést állati és növényi szövetféleségekből, úgymint : agy, máj, lép, bél, szív, izom, tüdő, pancreas, egérfarok, levél, vagy akár egész Drosophila. A MaxwellTM 16 Cell DNA Purification Kit mind prokarióta, mind eukarióta sejttenyészetek esetében sikeres izolálást biztosít, de a Gram+  baktériumoknál ehhez lizozimos előkezelés szükséges. Mindhárom kittel kapott DNS-oldatok tisztasága 1,7 feletti, közvetlenül vihetők tovább downstream alkalmazásokba. MaxwellTM 16 Total RNA Purification Kit segítségével egyszerre 16 mintából izolálhatunk RNS-t körülbelül 40 percen belül. A folyamat készülékben zajló automatizált részét a lizátum nyerése előzi meg, melynek során egy újfajta, nem szilika alapú mátrix segítségével történik a genomiális DNS maradéktalan eltávolítása. Egyfajta kittel nyerhetünk RNS-t többféle mintából, többek között: emlős és növényi szövet, vér, eukarióta sejjttenyészet. MaxwellTM 16 DNA IQ Reference & Casework Sample Kit az igazságügyi-orvostani laborokban már bizonyított DNA IQ technológián alapul, lehetővé téve mind az adatbázis célú, mind az eseti minták feldolgozását. A MaxwellTM 16  Polyhistidine Protein Purification Kit alkalmas polihisztidin és HQ (His-Glu x 3) címkével jelzett fehérje tisztítására baktérium-, emlős és rovarsejttenyészetből, valamint médiumból. A minta, vagy lizátum reagenstartóba való behelyezése után mindössze 40 percen belül nagytisztaságú fehérjéhez jutunk, mely tovább vizsgálható Western-blottal, tömegspektrometriával, vagy funkcionális assay-ben. Az applikációk száma folyamatosan nő.

További információk

Utolsó frissítés: 2007.04.21