Nukleinsav tisztítás, automatizálás
Nukleinsav tisztítás, automatizálás
• ÚJ! A Promega legújabb miniprepje a PureYieldTM Plasmid Miniprep System. A speciális szilika-oszlopot tartalmazó kittel transzfekciós minőségű plazmidot izolálhatunk akár 10 perc alatt is.
Ha a terméket még nem próbálta és vásárlás előtt szeretne megbizonyosodni annak - továbbá a PureYield Midi/Maxi Kit -kiváló minőségéről, a következő weboldalon ingyen mintát is igényelhet akár mindhárom termékből.
- Mikrocentrifuga (spin), vagy vákuum protokol
- Biztos: a neutralizációs lépést színváltozás jelzi (kék > sárga)
- Nagyon gyors protokoll: akár 10 perc
- Nem igényel etanolos precipitálást az elúciót követően
- Plazmidméret: 20 kb-ig tesztelt
- Kihozatal: 2 - 15 ug
- Feldolgozható baktériummennyiség: 600 ul (közvetlenül) - 3 ml (lepörgetés után visszavéve 600 ul vízben/TE pufferben).
- Elúciós térfogat: 30 ul
- Endotoxin Removal Wash a nagy tisztaságért (260/280 arány: 1,85-1,9)
- Downstream alkalmazások: fluoreszcens szekvenálás, in vitro transzkripció (pl. jelölt RNS próba készítése), in vitro transzkripció/transzláció (in vitro fehérjetermelés), eukarióta transzfekció (pool)
- Háromféle kiszerelés: 50 (A1221), 100 (A1223) és 250 (A1222) tisztításra
A Promega PureYield rendszerek összehasonlítása más gyártók termékeivel.
• A WizardTM SV Gel & PCR Clean-Up System a Promega kedvelt szilika-oszlop alapú kitje PCR-termék tisztítására agaróz gélből, vagy közvetlenül PCR reakcióból.
- Mikrocentrifuga (spin), vagy vákuum protokol
(A1331 vákuum adapter szükséges) - Tisztítás fenolos extrakció, vagy etanolos precipitáció nélkül
- Alkalmas ss/dsDNS vagy emésztett plazmid tisztítására
- Tisztítható dsDNS-méret 100 bp - 10 kb között, akár 95 % visszanyeréssel
- Rövid protokoll: 15 perc (vákuum)
- ~ 40 ug dsDNS megkötő képesség/oszlop
- Kompatibilis rengeteg PCR enhancerrel és különféle típusú agarózokkal
- Elúciós térfogat: 15 - 50 ul
- Downstream alkalmazások: fluoreszcens szekvenálás, klónozás, restrikciós emésztés, in vitro transzkripció/transzláció
- Kétféle kiszerelés: 50 (A9281) és 250 (A9282) tisztításra
• A Pure Yield RNA Midiprep System nagymennyiségű totál RNS gyors tisztítását teszi lehetővé DNáz, szerves oldószerek, proteáz emésztés vagy alkohol precipitáció nélkül. Az izolálás során a gDNS maradéktalan eltávolítása újfajta, nem szilika alapú technológiával történik. Akár 1 mg totál RNS-t is kinyerhetünk, a kiindulási minta sokféle lehet: szövet, sejttenyészet, baktérium, élesztő, növény, vér. További információk
• A Promega cég nemrég új termékcsoporttal - a Maxwell 16TM mágneses izoláló (genomiális DNS, totál RNS, His/HQ- Tag fehérje) automatával és hozzá használatos kitekkel - bővítette termékpalettáját. A rendszer legfőbb előnyei :
kis méret, nagyon egyszerű kezelhetőség
- ténylegesen minimális manuális munkaigény
- kiadagolt reagenseket tartalmazó reagenstartók
- az előkezelés nélküli izolálás szöveti minta esetén (DNS, fehérje) .
- az izolálás végeztével nincs szükség további centrifugálási lépésre
- 1-16 minta futtatható egyszerre
- időigény: protokolloktól függően 30-40 perc
Bemutatkozik a Maxwell 16 (PowerPoint előadás)
A Maxwell 16-ot világszerte sokféle kiindulási mintával próbálták ki sikeresen;
Példák a teljesség igénye nélkül:
DNS kivonás
RNS kivonás
Fehérje (His/HQ-Tag) tisztítás
DNS kivonás igazságügyi mintákból
Részletes cikkek (gDNS kivonás)
További információk honlapunk Termékek / Molekuláris biológiai műszerek menüpontja alatt.
• Az SV Total RNA Isolation System-mel gyorsan és hatékonyan tisztíthatunk nagymennyiségű totál RNS-t fenol-kloroform nélkül. Kiindulási anyagként a biológiai minták széles skálája (állati szövetek, sejt-szövettenyészet, baktérium, gomba, növényi anyag, vér, stb) szolgálhat. A genomiális DNS maradéktalan eltávolítása a kitben található RNáz-mentes DNázzal történik, közvetlenül a szilika mátrix oszlopon.
- Mikrocentrifuga (spin), vagy vákuum protokol
- Gyors és hatékony tisztítás fenol-kloroform alkalmazása nélkül
- Nagy mennyiségű és tiszta totál RNS
- Izolálás egyfajta kittel a biológiai minták széles skálájából (állati szövetek, sejt-szövettenyészet, baktérium, gomba, növényi anyag, vér, stb)
- A genomiális DNS maradéktalan eltávolítása - emésztés közvetlenül a szilika mátrix oszlopon a kitben lévő DNáz I-el
- Elúciós térfogat 50-100 ul
- Háromféle kiszerelés: 10 (Z3101), 50 (Z3100) és 250 izolálásra (Z3105)
A következő weboldalon az eddig próbált mintatípusokról is lehet tájékozódni.
Átlagos RNS kihozatalok mintatípusonként:
Pár megjegyzés az izoláláshoz:
- Az RNA Dilution Buffer hozzáadás + 70 fokos 3 perc inkubáció (ez együttesen egy protein precipitáló lépés) lépés más kitekben nem biztos, hogy megvan. Tapasztalatok szerint átlagosan kb 0,6 – 0,8 Ct érték változást jelent.
- A DNázos emésztés a membránon történik, a gyártói 15 perc helyett 45 perc inkubációs időt javaslunk. A termék tartalmazza a DNázt !
- A DNáz mixben lévő Yellow Core Buffer nevéből adódóan sárga, jelzi, hogy a DNázos elegy a teljes membránt átjárja, ha nem így van, az emésztés előtti etanolos mosásból maradt etanol a membránon.
- A gyártói 100 ul elúció helyett 50 ul-t javasolunk kb 1 perces inkubációval.